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產(chǎn)品介紹
2022年12月，中國(guó)食品藥品檢定研究院在《中國(guó)生物制品學(xué)雜志》上發(fā)表題為《TrypLE 雙抗體夾心定量 ELISA檢測(cè)方法的建立及驗(yàn)證》的研究論文，君研生物參與文章發(fā)表，該研究采用正交試驗(yàn)確定捕獲抗體、檢測(cè)抗體最佳濃度，建立TrypLE雙抗體夾心定量ELISA檢測(cè)方法，并對(duì)方法進(jìn)行線性范圍特異性檢測(cè)限、定量限、準(zhǔn)確性，重復(fù)性驗(yàn)證；采用建立的方法檢測(cè)多種生物制品，驗(yàn)證方法的適用性。
君研生物經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的方法學(xué)驗(yàn)證，自主研發(fā)了基于ELISA 的重組胰蛋白酶類似物定量檢測(cè)試劑盒，可準(zhǔn)確識(shí)別包括Gibco公司的TrypLETM在內(nèi)的多款進(jìn)口和國(guó)產(chǎn)重組胰蛋白酶及其類似物。
重組胰蛋白酶類似物定量檢測(cè)試劑盒（貨號(hào)KET01-96）可以快速，有效地檢測(cè)各種樣品中TrypLETM的殘留量。針對(duì)干細(xì)胞用戶，君研生物推出第二代產(chǎn)品（貨號(hào)KET02-96），擁有更低的靈敏度（定量限低至0.1ng/mL），更好的滿足多樣化的檢測(cè)需求。
優(yōu)勢(shì)特點(diǎn)
市場(chǎng)首發(fā)：市面上首個(gè)用于TrypLETM殘留檢測(cè)的產(chǎn)品
高效操作：全過(guò)程耗時(shí)短，總時(shí)間2小時(shí)以內(nèi)
簡(jiǎn)便操作：所有組分均為即用型，無(wú)需配置標(biāo)準(zhǔn)品，操作方便簡(jiǎn)單
性能優(yōu)越：特異性強(qiáng)、準(zhǔn)確度高、重復(fù)性好
適用性廣：可檢測(cè)多款重組胰酶類似物
性能指標(biāo)
| KET01-96 | KET02-96 | ||
| 檢測(cè)體系 | 30+30+15min | 檢測(cè)體系 | 60+60+15min |
| 檢測(cè)范圍 | 0.41-40 ng/mL | 檢測(cè)范圍 | 0.1-16ng/mL |
檢測(cè)限 | ≤ 0.4 ng/mL | 檢測(cè)限 | ≤ 0.1 ng/mL |
定量限 | 0.5 ng/mL | 定量限 | 0.1 ng/mL |
加標(biāo)回收率 | 80%-120% | 加標(biāo)回收率 | 80%-120% |
| 重復(fù)性（批內(nèi)CV） | ≤10% | 重復(fù)性（批內(nèi)CV） | ≤10% |
數(shù)據(jù)結(jié)果
標(biāo)準(zhǔn)曲線驗(yàn)證：
標(biāo)準(zhǔn)曲線經(jīng)4-PL擬合得到，KET01-96檢測(cè)范圍在0.41-40ng/mL，KET02-96檢測(cè)范圍在0.1-16ng/mL，R2均可達(dá)到0.99。
試劑盒通用性：
君研生物重組胰蛋白酶類似物定量檢測(cè)試劑盒可檢測(cè)包括Gibco公司的TrypLETM在內(nèi)的多款進(jìn)口和國(guó)產(chǎn)重組胰蛋白酶及其類似物。A.重組胰蛋白酶類似物定量檢測(cè)試劑盒檢測(cè)不同廠家重組胰蛋白酶及其類似物濃度值，均可穩(wěn)定檢測(cè)；B.重組胰蛋白酶類似物定量檢測(cè)試劑盒檢測(cè)不同廠家重組胰蛋白酶及其類似物稀釋線性均大于0.99。
檢測(cè)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)測(cè)定樣品中TrypLETM的微量殘留。用捕獲抗體包被96孔酶標(biāo)板，制成固相抗體，隨后加入標(biāo)準(zhǔn)品和檢測(cè)樣品，再加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的標(biāo)記抗體，形成一個(gè)固相抗體-TrypLETM-標(biāo)記抗體的三明治結(jié)合物，反應(yīng)結(jié)束后洗滌，然后加入底物進(jìn)行顯色反應(yīng)，底物在HRP的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在終止液的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色（如下圖）。在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算待測(cè)樣品中TrypLE的含量。
注： TrypLETM 是Thermo Fisher Scientific的注冊(cè)商標(biāo)
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（KET01-96） 產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（KET02-96）
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