技術(shù)服務(wù)
檢測(cè)背景
對(duì)于宿主細(xì)胞蛋白(Host Cell Protein,HCP)殘留的檢測(cè)，雙抗夾心ELISA法仍是目前HCP殘留檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)方法。然而，這種方法高度依賴于試劑盒中HCP抗體對(duì)于總宿主細(xì)胞蛋白的覆蓋率。若ELSA檢測(cè)中使用的抗體覆蓋率不足，可能在最終產(chǎn)品中漏檢某些殘留的HCP，進(jìn)而產(chǎn)生藥物在患者體中引起免疫反應(yīng)和其他藥物安全性問題的風(fēng)險(xiǎn)，所以各國藥典中均要求對(duì)HCP抗體的覆蓋率進(jìn)行驗(yàn)證。
君研生物針對(duì)客戶提供的樣品，包括哺乳動(dòng)物細(xì)胞(CHO、Vero等)、酵母細(xì)胞(漢遜酵母、釀酒酵母、畢赤酵母等)、大腸桿菌以及其他工程細(xì)胞的宿主細(xì)胞蛋白樣品，使用AAE-MS的方法，評(píng)估其對(duì)應(yīng)抗體的覆蓋率。
檢測(cè)原理（AAE-MS法）
抗體親和富集(Antibody Afhnity Extraction,AAE)，首先將抗HCP抗體偶聯(lián)到磁珠上，然后上樣HCP樣品,富集過程中HCP抗體可捕獲識(shí)別HCP，而未識(shí)別的HCP則被流穿，通過多次重復(fù)循環(huán)，直到?jīng)]有額外的HCP結(jié)合為止;最后通過低pH等條件洗脫、富集HCP。將富集前的HCP和富集后HCP進(jìn)行高分辨質(zhì)譜分析(LC-MS)，計(jì)算抗體的覆蓋率?？贵w親和富集與質(zhì)譜聯(lián)用(AAE-MS)可以數(shù)字化分析覆蓋率，同時(shí)可以鑒定單個(gè)HCP蛋白的身份信息，有助于決定檢測(cè)結(jié)果是否適合于工藝監(jiān)測(cè)和產(chǎn)品批次放行。
關(guān)注我們
區(qū)域經(jīng)理： 18701864343/13701962646（上海、廣東）
15851483166（江蘇、浙江、安徽、西南地區(qū)）
15234188795（全國區(qū)域）
技術(shù)支持： 19503412257
郵箱： [email protected]
地址： 山西省太原市小店區(qū)唐槐路100號(hào)聯(lián)東U谷太原科技創(chuàng)新中心13號(hào)樓D座
Copyright ? 2025-2026 All Rights Reserved. :晉ICP備2024052786號(hào)-1