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支原體 DNA（qPCR）檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品介紹
支原體（mycoplasma）是一類(lèi)沒(méi)有細(xì)胞壁、高度多形性、能通過(guò)濾菌器、可用人工培養(yǎng)基培養(yǎng)增殖的最小原核細(xì)胞型微生物，大小為0.1～0.3微米。由于能形成絲狀與分枝形狀，故稱(chēng)為支原體。
支原體作為實(shí)驗(yàn)室中常見(jiàn)的污染源，據(jù)統(tǒng)計(jì)約有 15%-35%的細(xì)胞被支原體污染。污染的主要來(lái)源有：
- 工作環(huán)境污染
- 操作者本身污染
- 培養(yǎng)基污染
- 污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染
- 實(shí)驗(yàn)器材帶來(lái)的污染
- 制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染
支原體污染會(huì)改變細(xì)胞內(nèi)DNA、RNA及蛋白表達(dá)，改變宿主細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能，影響細(xì)胞代謝和生長(zhǎng)，具有干擾病毒復(fù)制的不利影響。
君研生物自主研發(fā)的支原體 DNA（qPCR）檢測(cè)試劑盒專(zhuān)一性強(qiáng)，靈敏度高，可用于定性檢測(cè)主細(xì)胞庫(kù)、工作細(xì)胞庫(kù)、病毒種子批、對(duì)照細(xì)胞以及臨床治療用細(xì)胞中是否存在支原體污染，可與君研生物“宿主細(xì)胞殘留 DNA（磁珠法）樣本前處理試劑盒”以及全自動(dòng)核酸提取儀配套使用。本試劑盒的優(yōu)勢(shì)在于可覆蓋 150 多種支原體檢測(cè)，檢測(cè)限、精密度、耐用性好、專(zhuān)屬性強(qiáng)。
產(chǎn)品說(shuō)明
- 檢測(cè)限
10CFU/mL口腔支原體、豬鼻支原體、肺炎支原體等各國(guó)藥典提及的10種支原體標(biāo)準(zhǔn)菌株的檢出率為100%。
空白限
將DNA稀釋液作為樣本直接檢測(cè)，共計(jì)做24次提取并檢測(cè)，樣本均未被檢出。
- 精密度
對(duì)同一份支原體陽(yáng)性參考品平行測(cè)定十次，檢測(cè)結(jié)果均為陽(yáng)性，Ct值的變異系數(shù)≤5%。
- 專(zhuān)屬性
將常見(jiàn)生物制品（如：Human、Vero、CHO、HEK293、E.coli、畢赤酵母等）300 pg/μL基因組DNA作為樣本進(jìn)行提取檢測(cè)；其他工程菌（如嗜酸乳桿菌、發(fā)酵乳桿菌等）DNA作為樣本進(jìn)行提取檢測(cè)，均無(wú)檢出；將PBS、10%胎牛血清等陰性基質(zhì)作為樣本進(jìn)行提取檢測(cè)，無(wú)檢出。
- 耐用性
支原體標(biāo)準(zhǔn)菌株在不同稀釋基質(zhì)（如DMEM培養(yǎng)基、CHO無(wú)血清培養(yǎng)基等）、產(chǎn)品凍融，產(chǎn)品運(yùn)輸、多種機(jī)型改變（如ABI 7500，Bio-Rad CFX Opus96，Roche LightCycler 96 等）情況下均可以穩(wěn)定檢出。
- 聯(lián)合驗(yàn)證
與第三方機(jī)構(gòu)合作，在歐洲藥典指導(dǎo)下，用培養(yǎng)法、指示細(xì)胞培養(yǎng)法和qPCR的同步實(shí)驗(yàn)分別檢測(cè)10CFU/mL、100CFU/mL 的口腔支原體和肺炎支原體，進(jìn)行可比性研究。結(jié)果顯示100CFU/mL的口腔支原體和肺炎支原體指示細(xì)胞法檢測(cè)為陽(yáng)性；10CFU/mL和100CFU/mL的口腔支原體、肺炎支原體培養(yǎng)法及支原體DNA（qPCR）檢測(cè)試劑盒檢測(cè)均為陽(yáng)性，三種檢測(cè)方法具有可比性。
支原體 DNA（qPCR）檢測(cè)試劑盒 產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
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